Adv Sci丨江南大学张国强团队研究开发的CRISPR-DNA聚合酶能辅助靶向诱变实现可调控的实验室进化
iNature
2025-09-28 14:31
文章摘要
背景：实验室进化是改良生物分子和生物系统的有效方法，但传统方法存在突变率低、操作繁琐、突变窗口受限等问题。研究目的：江南大学张国强团队开发CRISPR-DNA聚合酶辅助靶向诱变系统（CTRLE），旨在实现可调控、高效率的实验室进化。该系统结合CRISPR-Cas9技术与噬菌体T5/T7 DNA聚合酶，扩展突变窗口至2000碱基，支持所有核苷酸替换类型，并通过MS2介导募集和dTnpB转录抑制系统降低脱靶率、实现精准调控。结论：CTRLE在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和乳酸克鲁维酵母中验证有效，能在短期内赋予多重抗生素抗性、提高蛋白分泌效率，为微生物持续进化提供高效通用工具。
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