Nat Biotechnol | 一面镜子照亮细胞“微观宇宙”！西湖大学章永登团队开发新型显微技术，以极低成本实现纳米级各向同性分辨

背景：荧光显微技术，特别是单分子定位显微术（SMLM），在生物学研究中至关重要，但传统三维SMLM存在轴向分辨率远低于横向分辨率的各向异性问题。双物镜4Pi-SMLM虽能实现各向同性纳米级分辨率，但系统复杂、成本高昂且校准严格，限制了广泛应用。研究目的：西湖大学章永登团队旨在开发一种简化、低成本且高性能的新型超分辨显微技术，以克服现有技术的局限性。结论：该研究成功开发出镜面增强4Pi单分子定位成像技术（me4Pi-SMLM），利用单物镜和镜面回射产生干涉条纹，将轴向分辨率提升约五倍，实现了2-3 nm的近各向同性定位精度和优于15 nm的各向同性分辨率。该技术系统复杂度低、维护简便、成本低廉，能无缝集成现有系统，并成功应用于双色成像、全细胞三维重构和活细胞成像，在脑组织切片等样本中清晰呈现了多种超微结构，展现出在分子尺度解析细胞结构与动态的巨大潜力。