Nat Commun | 荣知立/林瑛团队利用环状gRNA提高小型CRISPR/ Cas12f系统的编辑效率

本研究由南方医科大学荣知立教授和林瑛副教授团队完成，旨在解决Un1Cas12f在哺乳动物细胞中编辑效率低的问题。通过构建环状gRNA（cgRNA），显著提升了Cas12f系统在基因激活及腺嘌呤碱基编辑中的效率。研究采用工程化策略构建了特异性适配Un1Cas12f的cgRNA，实验结果表明cgRNA在结构稳定性和细胞内表达水平方面均优于常规gRNA，使Cas12f介导的基因激活效率提升1.9-19.2倍。此外，结合液-液相分离策略，基因激活效率再次提升2.3-3.9倍。在腺嘌呤碱基编辑系统中，cgRNA不仅提高了编辑效率，还显著缩窄了编辑窗口，实现高效率高精度编辑。小鼠体内实验证明cgRNA具备良好的体内递送兼容性和转化潜力。