Nano Lett. ¦带有简单、工程化crRNA的CRISPR/Cas12a实现了多种核酸生物标志物分析

本文介绍了CRISPR/Cas12a系统在核酸检测中的应用，特别是通过工程化crRNA的设计，实现了对miRNA和DNA单碱基突变的高灵敏度与特异性检测。研究背景是CRISPR/Cas12a作为一种RNA引导的核酸内切酶，具有高灵敏度的核酸检测能力，但现有方法在RNA检测和DNA单碱基突变检测中常需修饰crRNA，降低了特异性和增加了成本。研究目的是开发一种简便、高效、低成本且能用Cas12a直接检测DNA单碱基突变和RNA的方法。通过设计分裂的crRNA，作者发现分裂位点在第10和第11个碱基之间时系统活性最佳，并实现了无扩增检测，灵敏度达74.1fM。结论表明，该方法不仅适用于医学诊断，还适用于现场快速检测，具有广泛的潜力。