J. Am. Chem. Soc. | 用于选择性蛋白酶底物鉴定的大环噬菌体展示

本文介绍了一种用于选择性蛋白酶底物鉴定的大环噬菌体展示技术。背景方面，蛋白酶在细胞功能和病理状况中具有重要作用，但现有筛选方法多限于线性底物，易发生脱靶蛋白水解。研究目的是开发一种环肽噬菌体展示筛选技术，以提高蛋白酶底物的选择性。作者利用1,5-二氯-2,4-戊二酮（DPD）对噬菌体pIII外壳蛋白上的线性肽进行共价环化，形成环肽结构，并通过Knorr-吡唑环化构建大环蛋白酶底物文库。实验结果显示，该方法成功筛选出对人成纤维细胞活化蛋白α（FAPα）和二肽基肽酶-4（DPP4）具有高特异性的环肽底物，显著优于商业化蛋白酶指示剂。结论表明，该技术为蛋白酶特异性环肽底物的高通量筛选提供了有效平台，对多肽药物及探针开发具有重要意义。