ACS Chem. Biol. | 新型终端炔基识别酶BesA助力非天然“点击”二肽的高效合成

本文聚焦于ATP-Grasp酶家族成员BesA的催化机制与应用研究。背景方面，终端炔基作为生物正交化学中的关键官能团，在天然产物中极为罕见，导致其酶促识别系统稀缺。研究目的旨在阐明BesA如何特异性识别含终端炔基的L-丙炔基甘氨酸（L-Pra）并催化其与L-谷氨酸连接生成二肽的分子机制。通过X射线晶体学和分子对接模拟，发现Tyr33通过CH-π相互作用精准捕获L-Pra的终端炔基，突变实验证实该残基对底物亲和力至关重要。结论表明BesA不仅能高效合成γ-Glu-Pra，还可兼容L-高丙炔基甘氨酸等非天然底物，且通过R50A突变拓展了对L-谷氨酸类似物的催化能力，为构建适用于点击化学的含炔基肽段库提供了新型生物催化工具。