文献分享| Nat. Commun.：用于活细胞和固定细胞中内源性微管蛋白荧光纳米成像的生物相容性锍基化共价探针

背景：超分辨荧光显微镜是解析生物过程的核心工具，但其性能依赖低干扰的目标蛋白标记技术。传统标记策略如荧光蛋白融合或配体介导探针存在破坏蛋白功能、产生生物效应或应用受限等缺陷。研究目的：本研究旨在开发一种生物相容性好、能特异性共价标记内源性微管蛋白的荧光探针，以克服传统标记技术的局限，实现活细胞和固定细胞的高分辨率成像。结论：成功开发了基于锍离子可切割连接子的共价荧光探针6-SiR-oC₉-CTX。该探针具备良好的细胞渗透性、荧光增强特性和生物相容性，能特异性共价标记β-微管蛋白的Cys356位点，标记后配体可洗脱以避免干扰微管功能。实验证实其在多种细胞系中能有效标记内源性微管蛋白且无显著细胞毒性，兼容活细胞与固定细胞的STED超分辨成像，实现高分辨率可视化（固定细胞分辨率38±9 nm，活细胞49±13 nm），光稳定性满足时间序列成像需求。该成果为细胞骨架动态研究提供了新型工具，并为内源性蛋白共价标记技术提供了新思路。