将IV型CRISPR改造为大肠杆菌基因组编辑器

背景：CRISPR-Cas系统分为I类（多亚基）和II类（单亚基），其中I类IV-A型系统缺乏核酸酶活性，其基因组工程潜力尚未充分探索。研究目的：本研究从临床肺炎克雷伯菌分离物中鉴定了一个新的IV-A3型CRISPR-Cas系统，旨在表征其活性并改造为大肠杆菌的基因组编辑器。结论：研究发现该系统靶向质粒可降低转化效率，靶向基因组可抑制基因转录；通过将I-TevI核酸酶结构域融合到Cas8，成功实现了在大肠杆菌染色体靶位点引入双链断裂；进一步开发了多个版本的碱基编辑器，并成功应用于促进吲哚-3-乙酸的产生，展示了IV-A3型系统在基因组工程中的应用潜力。