中科大鲍坚强等以噬菌体重组酶增强基于Cas9的动物细胞敲入效率

背景：CRISPR-Cas9工具虽已彻底改变基因工程，但大片段DNA的高效精确整合仍是技术瓶颈。研究目的：开发一种重组酶增强的DNA整合方法（RED-CRISPR），旨在通过增强同源定向修复，在各种细胞类型中实现高效、精确的kb级DNA插入。结论：RED-CRISPR显著提高了HDR效率，在不同细胞中效率提升2-5倍，与其他策略协同可进一步提高；在CAR-T细胞和小鼠中实现了高敲入效率，同时大幅减轻了脱靶突变和染色体易位负担，成为一个强大的基因组编辑工具，具有广泛的生物医学和治疗应用前景。