为通过单AVV递送实现体内基因编辑对紧凑型Cas9迭代优化

背景：开发紧凑高效的CRISPR-Cas系统对基于病毒递送的体内基因组编辑应用至关重要。研究目的：通过迭代优化紧凑型Cas9同源基因Cme2，以实现通过单腺相关病毒（AAV）载体进行体内基因编辑。结论：研究通过sgRNA工程、蛋白理性改造和核定位序列优化，获得了增强系统enCme2，其在哺乳动物细胞中编辑效率显著提高，且保持高特异性和低脱靶活性；enCme2的小尺寸允许完整包装到单个rAAV载体中，成功应用于体内组织和小鼠胚胎的高效编辑，为构建转基因模型提供了便利工具。