Nat. Commun. | 通过低温电子断层扫描可视化溶酶体膜蛋白

背景：溶酶体是维持细胞稳态和信号传导的关键细胞器，其功能异常与神经疾病、溶酶体贮积症及癌症相关。然而，在天然环境中对溶酶体膜蛋白进行结构表征仍面临挑战，现有分离方法难以维持溶酶体的完整超微结构。研究目的：本研究旨在开发一种基于1D4表位标记的免疫纯化方法，结合冷冻电子断层扫描技术，以在完整的天然溶酶体膜内观察和分析溶酶体膜蛋白的结构与分布。结论：研究团队成功分离出保留天然膜结构的TRPML1-mNeonGreen-1D4和TMEM192-mCherry-1D4阳性溶酶体，并通过cryoET和质谱技术识别出V-ATP酶、Flotillin和Clathrin等关键膜蛋白，解析了它们的分布特征和结构，分辨率分别达到13.8 Å和26.6 Å。该方法为研究溶酶体膜蛋白功能提供了可靠平台，未来可应用于疾病机制研究。