原子修饰的向导DNA增强了TtAgo蛋白的切割活性实现了超灵敏核酸检测

本文主要探讨了通过化学修饰向导DNA（gDNA）来增强嗜热菌嗜热栖热菌来源的TtAgo蛋白的切割活性，从而实现超灵敏核酸检测的方法。文章首先介绍了TtAgo蛋白与gDNA结合的机制及其在高温下切割双链DNA的局限性。为了克服这些限制，研究者对gDNA进行了多种化学修饰，发现3′末端进行2′F修饰的gDNA（FATE）能显著提高解链温度和切割活性，最佳反应温度降低至60℃。基于此，研究者开发了FATE辅助核酸检测技术（FAST），该技术利用特殊的靶标模板和Bst DNA聚合酶，实现了对miR-21等核酸的高灵敏度和高特异性检测。研究结果表明，FAST技术能够检测到极低浓度的miR-21，并有效抵抗非特异性核酸的干扰，展示了其在实际样品检测中的应用潜力。总体而言，通过化学修饰gDNA，不仅提高了TtAgo蛋白的切割效率，还为核酸检测领域带来了新的技术突破。