Cell Chem. Biol.|内源性CRBN底物的检测和富集的方法

Ge Team 2025-09-03 20:04

文章摘要

本研究背景聚焦于Cereblon（CRBN）作为E3泛素连接酶复合物的适配器，能识别C末端环状酰亚胺修饰蛋白并引导其降解，但现有鉴定方法依赖质谱，缺乏高灵敏度、高通量且无需基因工程的手段。研究目的旨在开发一种新型类抗体试剂“cerebody”，用于检测和富集内源性CRBN底物。结论显示，通过蛋白质工程优化CRBN构建体（如CRBNmidi-RYD-P424A）获得的“cerebody”具有高亲和力和特异性，能在Western blot中检测低至10^−13 mol的靶蛋白，并成功富集GLUL、UROD等内源性底物，证明了其在加速CRBN底物发现和生化表征方面的有效性，但需进一步优化通用性和灵敏度。

查看文献： A method for the detection and enrichment of endogenous cereblon substrates
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